白癫风是一种由自身免疫、氧化应激、遗传等多因素引起的皮肤病。课题组以往主要关注于自身免疫方面。
为了明确黑素细胞特异性的膜抗原。首先提取黑素细胞膜蛋白,双向电泳分离蛋白,利用白癫风患者和正常人血清分别行免疫印迹,找出并切取差异点,然后质谱分析及生物信息学检索明确蛋白种类。课题组吕雅洁博士经过了上述工作流程后提示:线粒体内膜蛋白Mitofilin为白癫风相关抗原,并进行了初步的验证。为了进一步确认Mitofilin为白癫风相关抗原,在课题组以往工作的基础上进行了本部分的实验。
通过蛋白质组学方法明确自身免疫性疾病的自身抗原是研究自身免疫疾病的常用方法。由于蛋白质组学技术本身的局限性,并不能完全确定蛋白种类,而通过利用患者自身血清和特异性抗体分别进行免疫沉淀和免疫印迹是确认自身抗原的常用手段。
Tamotsu等应用了类似的实验方法明确大疱性类天疱疮170kDa和230kDa的自身抗原。Cui等也应用同样的方法明确了白血病自身抗原rho-GDI白癫风有哪些病因2。在本实验中我们白癜风传染吗设置了阳性对照组。利用Mitofilin抗体与膜蛋白行免疫沉淀和免疫印迹,如果结果阳性,说明整个实验系统良好。实验组与对照组均在90kDa附近均出现了阳性条带。说明白癫风患者血清中存在针对Mitofilin的自身抗体,从而确认Mitofilin为白癫风相关自身抗原。
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