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免疫印迹筛选白癜风患者血清

手机站 发布时间:2014-07-23

  从免疫印迹筛选血清结果来看69例白瘫风患者血清中gIG抗体识别的分子量与国外报道大体一致,但阳性率有所不同,其中90KD、75KD抗原的阳性率(39.7%、72.4%)接近于数据。由于活细胞ELIsA筛选过的高滴度白瘫风血清gIG是针对黑素细胞膜抗原的抗体,高滴度gIG抗体表明针对黑素细胞膜抗原的gIG抗体滴度较高,所以针对90KD、75KD抗原白癜风如何预防的白瘫风血清gIG阳性率的增高也能够间接反映90KD、75K抗原(部分)是黑素细胞表面抗原。本实验中40一45KD的抗原阳性率(13.8%),远低于国外的数据。

  通过cDNA显示库技术筛选到了一个膜抗原—黑素浓集受体1,分子量约为43KD,可被自身抗体识别并发生黑素细胞破坏,患者血清结合率仅为1.64%,大多数白瘫风患者血清并不能与该抗原结合。本实验中40一45KD的阳性条带抗原可能是MCHR一1,血清识别率比较接近。

  如何证实这些阳性抗原是目前主要的研究重点。我们试图利用免疫沉淀法或亲合层析法分离、纯化膜抗原,但均未成功。随着蛋白质组学的日新月异,各项技术日趋完善,也为蛋白的分离、纯化和鉴定提供了新的思路。制备全息蛋白是蛋白质组学研究的关键点之一。生物膜系统包括细胞质膜和真核细胞中的细胞内膜,具有重要的生物功能和特征性分子结构特点。根据膜蛋白分离的难易程度及其与脂分子的结合方式。

  膜蛋白可分为两大基本类型:外在膜蛋白或称为外周膜蛋白和内在膜蛋白或称为整合膜蛋白,外在膜蛋白为水溶性蛋白,靠离子键或其它较弱的的键与膜表面的蛋白质分子或脂分子结合。因此,只要改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来,膜结构并不破坏。

  内在膜蛋白以不同程度嵌入脂双层的内部,多为横跨全膜,其疏水区域与脂双层中脂类分子的疏水尾部相互作用,亲水区域暴露在膜的一侧或两侧表面。内在膜蛋白与膜结合非常紧密,不易分离,只有用去垢剂使膜崩解后才可分离出来,但分离后易失去其正常的结构。

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